前言
腎盂腎炎(pyelonephritis)又稱上尿路感染,是病原微生物侵入腎盂、腎間質(zhì)和腎實質(zhì)所引起的炎癥性病變,好發(fā)于女性,男:女為1 : 10。根據(jù)臨床病程及癥狀,腎盂腎炎可分為急性及慢性兩期。急性腎盂腎炎若治療不當常可復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)為慢性,最終進入慢性腎功能不全階段。雖然隨著疾病譜的變化,以腎盂腎炎為基礎(chǔ)病變導(dǎo)致慢性腎功能不全的比例逐漸下降,但腎盂腎炎的發(fā)病率、復(fù)發(fā)率以及急性腎盂腎炎的轉(zhuǎn)慢率并未見降低。因此,制作與人類腎盂腎炎相似的動物模型,從發(fā)病機制上認識腎盂腎炎,研究行之有效的治療方案是一項很有意義的工作。
部分造模方法
使用動物:大鼠
【造模機制】:
暫時性結(jié)扎一側(cè)輸尿管,向膀胱內(nèi)注入大腸埃希菌,造成急性尿路感染,可形成急性、逆行性腎盂腎炎。
【造模方法】:
1.動物 雄性Sprague Dawley大鼠,體重(200±20)g。
2.模型制備 選用大腸埃希菌O111B4標準菌株,37℃培養(yǎng)箱中肉湯過夜培養(yǎng)24小時,使其濃度達0.5麥氏單位,再用加樣器稀釋菌懸液,使最終濃度達105/ml。大鼠禁水18小時后,2%戊巴比妥鈉40mg/kg,腹腔注射麻醉。動物仰臥固定于手術(shù)臺上,腹部皮膚去毛后消毒,下腹正中切口約2cm, 逐層切開腹壁進入腹腔,在左側(cè)后腹壁辨識左側(cè)輸尿管后,在中段兩側(cè)分別向后腹壁外側(cè)穿線,暴露膀胱,用動脈夾夾閉陰莖,用TB針向膀胱內(nèi)緩慢注射0.5ml菌液,然后拉緊腹壁外側(cè)的縫合線兩端,以適當?shù)乃删o度“結(jié)扎”輸尿管,清理腹腔,逐層縫合腹壁,恢復(fù)供水和飲食。術(shù)后24小時拆去腹壁外面的輸尿管結(jié)扎線,使輸尿管重新開放。
3.樣本收集和指標測定 術(shù)后第7天用小夾子夾住尿道外口,防止尿液流出,處死動物,取出左右腎臟。肉眼觀察雙腎大小及表面并稱重,縱行切開腎觀察縱切面,無菌操作抽取膀胱尿液,接種于平板培養(yǎng)基上,取1/2左腎制成勻漿做培養(yǎng),將縱切的另1/2左腎做病理組織切片,染色光鏡檢查。
【模型特點】:
1.結(jié)扎側(cè)腎臟表面可見數(shù)量不等的微小膿腫,個別腎臟可見較大膿腫突出腎臟表面,病變較重模型組動物左腎明顯大于右腎,縱切面可見大小不等的膿腫,腎盂擴張,有少量膿性分泌物。
2.動物左腎組織出現(xiàn)明顯病理學(xué)改變,腎盂黏膜充血水腫,黏膜下大量中性粒細胞浸潤,腎內(nèi)可見大小不等的膿腫,少數(shù)腎小管內(nèi)可見膿細胞和管型。
3.動物尿路感染嚴重,尿液細菌培養(yǎng)陽性率高達80%,左腎組織勻漿細菌培養(yǎng)陽性率也高達80%。
【模型評估和應(yīng)用】:
人類腎盂腎炎的致病菌以大腸埃希菌最多,逆行性感染是最常見的傳染途徑。大鼠容易發(fā)生尿液自發(fā)性反流,易于造成逆行性感染,采用一側(cè)輸尿管暫時性阻塞、膀胱內(nèi)注射大腸埃希菌造成的急性逆行性腎盂腎炎模型,從致病菌、傳染途徑和病理學(xué)改變等方面均與人類急性腎盂腎炎相似。大鼠模型制作方法簡單,重復(fù)性好,是研究人類腎盂腎炎合適的動物模型。而且模型中左腎增大,病變明顯,而右腎無明顯改變,故可作自身對照。
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