前言
原發(fā)性肝癌(primary liver cancer)是世界范圍內(nèi)死亡率最高的惡性腫瘤之一。我國是肝癌發(fā)病率較高的國家之一，其發(fā)病率居我國惡性腫瘤發(fā)病率的第二位。原發(fā)性肝癌中95％屬于肝細(xì)胞肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是由化學(xué)致癌物、病毒等多種因素引起的肝細(xì)胞生長失控而導(dǎo)致的癌變，與多種基因的調(diào)控和表達(dá)密切相關(guān)。目前，肝癌的致病機(jī)制尚未研究清楚，隨著對肝癌動(dòng)物模型研究的不斷探索，已經(jīng)建立了自發(fā)性、誘發(fā)性、種植性及轉(zhuǎn)基因動(dòng)物肝癌模型。由于這些模型較好地模擬了人類肝癌，因而可用于肝癌的生理、細(xì)胞和分子等發(fā)病機(jī)制方面的研究，也可用于肝癌治療藥物的篩選以及基因治療的探索。
部分造模方法
使用動(dòng)物：大鼠
【造模機(jī)制】：
誘發(fā)性肝癌動(dòng)物模型是指用化學(xué)、物理及生物致癌因素作用于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，模擬肝損傷－纖維化－惡性轉(zhuǎn)化的周期變化，誘發(fā)動(dòng)物形成的肝癌。目前以化學(xué)誘癌劑誘發(fā)為主，常用致肝癌的物質(zhì)有二乙基亞硝胺(diethylnitrosamine,DEN)、對二甲基氨基偶氮苯(dimethylaminoazobenzene,OBA)、2-乙酸氨基酸(2-acetylamino fluorine,2-AAF)、亞氨基偶氮甲苯(o-aminoazotolueue,OAT)和黃曲霉素(aflatoxin,AF)。
【造模方法】：
DEN誘導(dǎo)模型：單用時(shí)可給予Sprague Dawley大鼠或Wistar大鼠0.25％DEN水溶液按10mg/kg劑量灌胃，每周一次，同時(shí)每天以0.025％DEN水溶液供動(dòng)物飲用，連續(xù)喂養(yǎng)6個(gè)月?；蚪o予一次性腹腔注射0.5％DEN的無菌水溶液(100mg/kg), 1周后開始持續(xù)供給100mg/L的DEN無菌水溶液自由飲用直至16周；其間第9~11周改供給無菌水。DEN亦可聯(lián)用2-AAF即Solt-Farber誘癌法：一次性給予大鼠腹腔注射200mg/kg DEN溶液，2周后喂養(yǎng)含0.02％2-AAF飼料14天，第3周行大部分肝切除，第4周恢復(fù)普通飼料喂養(yǎng)。
DBA誘導(dǎo)模型：即用含0.06％DAB飼料喂養(yǎng)，并控制維生素B2含量(≤1.5~2.0mg/kg)，連續(xù)喂養(yǎng)4~6個(gè)月。
2-AAF誘導(dǎo)模型：含有0.05％2-AAF飼料喂養(yǎng)Sprague Dawley大鼠，連續(xù)3~4個(gè)月。
OAT誘導(dǎo)模型：用含1％OAT溶液(10mg/ml)涂在小鼠的兩肩胛間皮膚上，隔日1次，每次2~3滴，連續(xù)7~8周。
AF誘導(dǎo)模型：大鼠肝癌每月飼料中含0.001~0.015ppm喂6個(gè)月。或用二甲基亞砜(DMSO)溶解AF，按每天400µg/kg腹腔注射1次，連續(xù)2周后停止注射，一次性再注射0.75~1.50mg/kg的AF，2周后行肝大部分切除術(shù)。
【模型特點(diǎn)】：
DEN為最常見的化學(xué)誘癌劑，誘發(fā)大鼠致癌率為80％。DBA法6個(gè)月即可發(fā)生肝癌，誘癌率為60％。2-AAF誘導(dǎo)3周即可出現(xiàn)癌前病變，鏡下見肝細(xì)胞呈卵圓形細(xì)胞增生，且具大小不等的癌巢結(jié)節(jié)，3～4個(gè)月后有80％~90％動(dòng)物產(chǎn)生肝腫瘤。OAT涂抹法給藥后8周即出現(xiàn)結(jié)節(jié)，7個(gè)月后即誘發(fā)小鼠肝癌，誘癌率為50％左右。AF誘發(fā)大鼠肝癌發(fā)生率為80%，但病程較長，腫瘤多為彌漫結(jié)節(jié)型。
【模型評估和應(yīng)用】：
誘發(fā)性模型起病隱匿、誘導(dǎo)周期長。誘導(dǎo)過程中動(dòng)物的死亡率較高，肝癌發(fā)生的部位、病灶數(shù)及時(shí)間等個(gè)體差異也較大。目前，該模型多用于肝癌病因?qū)W、遺傳學(xué)及生物學(xué)等方面的研究。
參考文獻(xiàn)：
1.陳華，趙德明. 肝癌動(dòng)物模型．實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)科與管理，2005,22 (4):32-35
2.施新猷．現(xiàn)代醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)．北京：人民軍醫(yī)出版社，2000
3.潘敦，張澍，李宗芳，等．二乙基亞硝胺誘發(fā)大鼠肝癌過程中脾臟巨噬細(xì)胞的變化．中華實(shí)驗(yàn)外科雜志，2009, 26 (5):588-591
4.Bakiri L, Wagner EF. Mouse models for liver cancer. Mol Oncol, 2013, 7 (2):206-223
5.Newell P, Villanueva A,Friedman SL, et al. Experimental models of hepatocellular carcinoma. J Hepatol, 2008, 48(5):858-879
6.Sonoda A, Nitta N, Nitta-Seko A, el al. Time-coursestudies of implanted rabbit VX2 liver tumors to identify the appropriate time for starting hepatic arterial emholization in animal models. Oncology, 2011, 80 (1-2):92-96
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